DIY丨凝胶电泳系统(迷你)

原文来自Instructables


做一个小型凝胶电泳系统的DNA分析。凝胶电泳系统是任何分子生物学研究的基本工具,但购买往往昂贵。制造这个DIY系统的总成本大约在$ 50- $ 80,取决于你从何处采购激光切割丙烯酸零件。

从McMaster-Carr:

2-56手动攻 丝锥,Cat#2522A663 攻丝扳手滑动T形手柄,0-1 / 4英寸(1.6-6.3mm)攻丝尺寸,目录号2546A22 2x 2-56尼龙盘头开槽机械螺丝,3/16“长度,Cat#93135A076 4x 2-56 1/8”尼龙盘头开槽机械螺丝,长度1/8“,目录号93135A074 不锈钢丝,0.01”直径, 9882K31 2x 6/32六角机械螺母Cat#91841A007 2x平垫圈,6号螺钉尺寸,5/16“Cat#92141A008

来自TAP Plastics:

IPS焊接水泥#3或4,Cat#10792 Hypo型溶剂型水泥涂药,猫#25658

从Digi-Key:

2个香蕉插头,目录号655K-ND

黑色香蕉插头线,36" ,猫#4771-36-0-ND

红香蕉插头线,36" ,猫#4771-36- 2-ND

4x橡胶脚,目录号SJ5012-0-ND本教程中介绍的几乎所有装配步骤都需要使用快速固化,清澈,稀薄的液态粘固剂Weld-On#4将定制激光切割丙烯酸材料部件溶剂焊接在一起。使用注射器施加器将边缘焊接到边缘,并通过毛细管作用被拉入接触表面。这实际上是一个简单而快速的程序,但是,如果这是一个新的技术给你,一定要练习焊接两块丙烯酸碎片。 完成组装的总时间为2-3小时。一旦完成,您将有以下部分:

- 一个紫外线透射凝胶托盘铸造一个7×7厘米的迷你凝胶和梳子;

- 带盖的电泳室。

第1步:零件和工具






丙烯酸材料和设计文件

从任何亚克力材料供应商(麦克马斯特 - 卡尔,美国塑料等):

12“×12”×1/4“透明丙烯酸

12”×12“×1/4”蓝色丙烯酸(或首选颜色)

5" ×5" ×1/8"透明的丙烯酸

自McMaster-Carr:

6" ×6" ×1/16"特氟隆片,目录号8545K13

从环路丙烯酸:

1/8" solacryl(UV透射) - 可选:如果你不需要一个紫外线透射凝胶盘,然后简单地使这些部件从普通的透明丙烯酸。

使用以下附件中的设计文件,从材料中剪切零件 - 要使用的材料类型在文件标题中给出。如果您没有使用激光切割机,您可以将文件发送到任何激光切割服务(我们使用Pololu)。除了solacryl,这些服务还将包含大部分所需材料。您也可以从我们的网上商店(IO Rodeo,Cat#IMG-01)购买套件,价格为93美元。该套件包含所有的激光切割零件和硬件,铂丝(而不是不锈钢丝)和预先组装的梳子。您仍然需要购买Weld-On。

硬件和工具

2-56手动攻丝锥,Cat#2522A663 攻丝扳手滑动T形手柄,0-1 / 4英寸(1.6-6.3mm)攻丝尺寸,目录号2546A22

2x 2-56尼龙盘头开槽机械螺丝,3/16“长度,Cat#93135A076

4x 2-56 1/8”尼龙盘头开槽机械螺丝,长度1/8“,目录号93135A074

不锈钢丝,0.01”直径, 9882K31

2x 6/32六角机械螺母Cat#91841A007

2x平垫圈,6号螺钉尺寸,5/16“Cat#92141A008

来自TAP Plastics:

IPS焊接水泥#3或4,Cat#10792 Hypo型溶剂型水泥涂药,猫#25658

从Digi-Key:

2个香蕉插头,目录号655K-ND

黑色香蕉插头线,36" ,猫#4771-36-0-ND

红香蕉插头线,36" ,猫#4771-36- 2-ND

4x橡胶脚,目录号SJ5012-0-ND


第2步:梳子组装





按照这两个视频中的说明完成组装凝胶梳的第一步。

youtu.be/tDTkdZbuxv4(需要科学上网)

youtu.be/zCSAWBSX9vQ(同上)



第3步:凝胶托盘组装





步骤3A

将凝胶盘底座平放在台面上。取一个凝胶盘侧面,并将接片垂直插入插槽,并与底盘基座成直角。任何纸张覆盖面都应该面向OUT。将Weld-On应用到关节并离开2-3分钟。将第二块凝胶盘放在适当位置。在焊接之前,确保两边的方向相同,即梳齿排列的缺口。

材料:2 x凝胶盘边; 1 x solacryl gel tray base

步骤3B

取两个凝胶盘翼,将纸面朝下放在台面上。从上面的步骤1中取出部件,并从两侧取下剩余的纸张。如图所示倒置在翅膀上,使标签和插槽正确排列,并将Weld-On应用于两个关节。 材料:部分来自步骤3A; 2个凝胶托盘翅膀

步骤3C 取出所有剩余的纸张背衬并插入梳子,确保一切正确。

步骤4:电泳槽组件







步骤4A 取下油箱底座,从一侧取下纸背。把纸片放在桌面上。将两个水箱内侧垂直放置在底座的顶部,使边缘齐平。沿关节施加焊接。

材料:2 x坦克内侧; 1个油箱底座

步骤4B 将上面组装的零件放到油箱支脚上。丙烯酸焊接两部分之间的接头。

材料:部分来自步骤4A; 2×油箱脚;

步骤4C 将四个电极安装座(带螺钉)添加到油箱支脚。确保安装位置正确,螺丝孔远离中心。

材料:部分来自步骤4B; 4 x电极安装

步骤4D 一方面,将一根电极线缠绕在其中一个螺丝上。拉伸导线并将其绕在第二个螺钉上,确保电极导线保持笔直。确保另一侧有多余的导线(多余的导线将缠绕在香蕉插头上)。在另一边重复。确保带有多余电线的一对螺丝位于水箱的同一侧。

材料:部分来自步骤4C; 电极丝; 导线推剪

步骤4E 取出没有孔的槽侧,取出纸背的一面。把纸片放在桌面上放平。将步骤4D的部分向下放置,使两个线端位于相反的一侧。与零件对齐。丙烯酸焊缝沿关节。带孔的外罐侧重复此过程。请注意,导线末端现在应与图中相反的孔位于同一侧。

材料:部分来自步骤4D; 2个有色水箱侧面(蓝色显示)

步骤4F

将其中一个水箱外壁安装到组装部件中。零件应贴合。沿着所有3条边进行焊接。重复相反的一面。

材料:部分来自步骤4E; 2个水箱外壁

步骤5:电极组件



将两个香蕉插头插入水箱侧面的孔中。在水箱内部,在香蕉插头的末端放置一个垫圈。将电极线绕过插头3-4次。最后,将螺母放在香蕉插头的末端,拧紧螺母,将导线固定到位。剪下任何多余的电线。重复第二个孔的过程来制造另一个电极。

材料:上一步组装的罐; 2个香蕉插头; 2个洗衣机; 2个坚果; 电线剪

第6步:盖组件




最后,收集制作盖子的丙烯酸部件。从所有五个部分的一侧取下纸衬,并沿边缘焊接以组装罐盖。把盖子放在成品罐上!

材料:1个盖子基地; 2×盖侧(长); 2个盖子(短)

步骤7:样品凝胶



上传图像中显示的样本凝胶是含有SYBR安全DNA凝胶染料(Invitrogen)的1.2%琼脂糖/ TBE凝胶。泳道含有1kb DNA梯(Promega)。凝胶在100V下电泳并用我们的开放式紫外透射仪观察。用数码相机和Cokin A002过滤器进行成像。


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编辑于 2019-07-26

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